FLOW 1.2
در ۵۵ درجه به مدت ۱۵ و در ۲۵۰ درجه با سرعت ۶ به مدت ۲ دقیقه نگه داشته می شود.
برای شناسایی فنیل جیوه کلراید از دستگاه GC استفاده می کنیم. برای این کار سه محلول۱۰، ۴۰ و ppm 100 تهیه گردید. فیبرها را در این محلول ها گذاشته و با یک همزن مغناطیسی توسط یک مگنت به مدت ۱۰ دقیقه هم زده شده اند. سپس فیبرها را از درون محلول ها بیرون آورده و خشک کرده و درون سرنگ SPME قرار داده و سرنگ SPME داخل محل تزریق دستگاه GC گذاشته شد. داده ها در جدول زیر آمده است.
غلظت فنیل جیوه کلراید | Ret.Time | Area |
۱۰ | ۱۱٫۸۴۵ | ۲۰۳۲۸۴۲۴ |
۴۰ | ۹٫۵۰۸ | ۲۸۶۴۲۳۴۴ |
۱۰۰ | ۹٫۵۴۲ | ۳۰۶۰۸۰۴۰ |
جدول(۳-۵) داده های دستگاه GC برای فنیل جیوه کلراید
فصل چهارم
بحث و نتیجه گیری
۴-۱٫ سنتز پلیمر قالب مولکولی و پلیمر شاهد
سنتز این پلیمر، پلیمریزاسیون تودهای و روش غیرکووالانسی میباشد. یک ویال یا شیشه پنی سیلین بزرگ را برداشته و در آن مقدار۰٫۶۵۷ گرم فنیل جیوه کلراید به عنوان ماده اصلی یا آنالیت می ریزیم سپس به آن مقدار ۳۰ سی سی کلروفرم به عنوان حلال و مقدار۳۰ میلی مول یا ۵۴/۲ میلی لیتر از مونومر عاملی متاکریلیک اسید اضافه می کنیم. سپس شیشه پنی سیلین را به مدت ۱۰ دقیقه در داخل دستگاه التراسونیک قرار داده تا مخلوط فنیل جیوه کلراید بخوبی هم خورده و در حلال حل شود حال ایجاد کننده پیوندهای عرضی اتیلن گلیکول دی متاکریلات (EGDMA) را به مقدار ۱۲۰ میلی مول یا ۶۳۲/۲۲ میلی لیتر به آن اضافه کرده.و سپس آغازگر (۲و’۲-آزو بیس ایزو بوتیرو نیتریل) را به مقدار ۲۸۰ میلی گرم به مخلوط اضافه می کنیم. مخلوط مورد نظر به مدت ۱۰ دقیقه در محیط گاز نیتروژن قرار گرفته تا اکسیژن حل شده در آن حذف گردد. وجود اکسیژن مانع از فرایند پلیمریزاسیون رادیکالی می شود.سپس لوله های مویین کشیده شده به طول ۴ سانتی متر را از این مخلوط پر کرده ودو سر لوله مویین را با درپوش یا چسب چسبانده و آن را در داخل حمام آب گرم در دمای ۶۰ درجه سانتی گراد وبه مدت ۱۲ ساعت قرار می دهیم تا پلیمر در داخل لوله های مویین تشکیل شود. سپس پلیمرهای تشکیل شده را در داخل اسید HF به مدت ۱۵الی ۲۰ دقیقه قرار داده تا پلیمر به صورت فیبر یا رشته ای به طور کامل از شیشه جدا شود. سپس فیبر های پلیمری را بوسیله متانول به مدت ۳۰ دقیقه شتشو می دهیم تا عوامل مزاحم حذف شوند. سپس بوسله ی استون و آب مقطر دوبار تقطیر با نسبت (۷۰/۳۰) ( V/V) به مدت ۳۰ دقیقه شتشو میدهیم تا تمام جیوه یا آنالیت موجود در پلیمر حذف گردد. سپس پلیمرها را در یک کوره کربولیتی در دمای ۲۰۰ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه همراه با بخار آب حرارت می دهیم تا پلیمرها تعدیل(اصلاح) گردند. شیوه سنتز NIP دقیقاً مشابه شیوه سنتز MIP است، تنها با این تفاوت که فنیل جیوه کلراید (ماده اصلی) در فرایند تهیه NIP استفاده نمیشود.
.
۴-۱-۱٫ پلیمریزاسیون پلیمر قالب مولکولی
با توجه به ساختار مونومر بکار رفته ودیگر عوامل کاربردی مشخص میشود که پلیمریزاسیون افزایشی ورادیکالی است
۱۰۹۶
C
مقدار ثابت
۶۷/۰
۴۲۶۵/۰-
۴۰۲۰-
MGR
مالکیت مدیریتی
۱۸/۰
آماره F
۰۰۲/۰
ضریب تعیین تعدیل شده
۶۷/۰
P-Value
۰۷/۲
آماره دوربین واتسون
فرضیه سوم در مورد رابطه بین مالکیت نهادی و ارزش بازار شرکتهای پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران مطرح گردید. نتایج نگاره۴-۷ نشان دهنده بهینه بودن مدل برای آزمون فرضیه است. آماره F و سطح معناداری موید معنادار بودن مدل برای آزمون فرضیه است. نتایج آزمون دوربین واتسون نیز نشان دهنده عدم وجود خود همبستگی بین جملات اخلال است. همان طور که نتایج نشان می دهد متغیر مالکیت مدیریتی بعنوان متغیر مستقل بر ارزش بازار که بعنوان متغیر وابسته در تحقیق شناخته می شود تاثیر نمیباشد. در نتیجه با توجه به نتایج جدول فوق فرضیه سوم که مبتنی بر وجود رابطه بین ارزش بازار و مالکیت مدیریتی شرکتهای پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران می باشد پذیرفته نمی شود.
خلاصه فصل
این تحقیق به بررسی رابطه میان بررسی رابطه بین ساختار مالکیت و ارزش بازار شرکتهای پذیرفته شده در بورس اوراق بهادارتهران می پردازد در این تحقیق از متغیرهای مالکیت نهادی، شرکتی و مدیریتی به عنوان شاخص ساختار مالکیت استفاده گردیده است. نتایج حاکی از وجود رابطه متغیرهای مالکیت نهادی، شرکتی و مدیریتی به عنوان شاخص ساختار مالکیت با ارزش بازار دارد که هدف اصلی این پژوهش می باشد.
نتیجهگیری و پیشنهادات
مقدمه
همانگونه که در فصول قبل بیان شد؛ به نظر میرسد بازار سرمایه از طریق اثرگذاری بر فرآیندهای تأمین مالی و سرمایهگذاری بر بازدهی سایر بخشها و در نهایت، بر بازدهی کل بازار تأثیر میگذارد. اگر بازار سرمایه عملکرد خوبی نداشته باشد سایر بخشها از آن تأثیر پذیرفته، در روند حرکت آنها اخلال ایجاد میشود. هدف از تحقیق حاضر شناخت و بررسی عملکرد بخشی از بورس اوراق بهادار تهران از نظر تأثیر پذیری و رابطه با ارزش بازار شرکتها بوده است. بدین جهت براساس تجربه مطالعات قبلی انجام شده در کشورهای مختلف و تحقیقات داخلی و خارجی صورت گرفته در این زمینه، تلاش گردید تا ترکیب مناسبی از متغیرهای ساختار مالکیت انتخاب گردد و رابطه آنها و چگونگی تأثیرگذاریشان بر ارزش بازار شرکتهای پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار مورد آزمون و بررسی قرار گیرد. روش مورد استفاده در این مطالعه جهت تجزیه و تحلیل اطلاعات آزمون رگرسیون حداقل مربعات بوده است.
این فصل از تحقیق در پی دستیابی و ارائه نتایج نهایی تحقیق است تا در نهایت بتواند با شفاف سازی روابط میان متغیرهای مورد نظر، جهت تصمیمگیریهای درست و منطقی، افقی را فرا روی سرمایه گذاران، مدیران و همه کسانی که به نحوی در ارتباط با بازار سرمایه هستند، بگذارد و همچنین با ارائه پیشنهادات تحقیقاتی در گستره کاربرد این بررسی، زمینه گسترش تلاشهای صورت گرفته در این تحقیق در آینده فراهم شود.
خلاصه فصول گذشته
هدف اصلی این رساله، بررسی هم انباشتگی رابطه میان متغیرهای ساختار مالکیت از جمله مالکیت نهادی، مالکیت شرکتی و مالکیت مدیریتی با ارزش بازار شرکتهای پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران میباشد.
در فصلهای اول و دوم این رساله، ادبیات نظری و تجربی مربوط به ارزش بازار و ساختار مالکیت مورد بحث قرار گرفت. دیدگاههای مختلفی در خصوص نحوه اثر گذاری متغیرهای ذکر شده بر روی ارزش بازار وجود دارد.
همچنین در فصل دوم ابتدا مطالعات و تحقیقات انجام شده پیشین از نظر گذرانده شده، مروری بر تحقیقات انجام شده قبلی سایر کشورها حاکی از تحقیقات متنوعی بوده و از طرفی اهمیت موضوع را خاطر نشان میساخت و نشان میدهد که اتفاق نظری درباره رابطه موجود بین ارزش بازار و متغیرهای مالکیت نهادی، مالکیت شرکتی و مالکیت مدیریتی در کشورهای مختلف وجود ندارد. بدین معنی که گروهی رابطه مثبت و برخی رابطه منفی را با ارزش بازار آزمون کردهاند در حالی که بعضی دیگر از محققین نتیجه گرفتند که رابطه معناداری میان این متغیرها و ارزش بازار در بورس اوراق بهادار وجود ندارد.
در فصل سوم جهت تجزیه تحلیل دادهها جمع آوری شده از بورس اوراق بهادار و از مدل رگرسیون حداقل مربعات و کارکرد این روش به طور مفصل در فصل سوم از نظر گذشت.
۱-۴ مطالعه استراتژی سازمان
در ابتدا سعی بر آن شد که شرکت طرح پیمان کاسپین را به خوبی شناخته و با زمینه های کاری و نوع فعالیتهای آن، همچنین اهداف و استراتژی های اصلی که شرکت سعی در تحقق آنها دارد آشنا شده؛ محدودیتها، فرصتهاو نقاط ضعف و قوت سازمان شناسایی شوند. بدین منظور بیانیه شرکت مطالعه و با مدیران ارشد سازمان گفتگو و با مدیر عامل شرکت جناب آقای مهندس دهقانی مصاحبه گردیده است. همچنین ماتریس swot که در سازمان با همکاری مدیران تهیه گردیده نیز در زیر آورده شده است. مصاحبه با مدیر عامل شرکت در پیوست الف آمده است.
۱-۱-۴ معرفی شرکت طرح پیمان کاسپین
شرکت کاسپین یکی از شرکتهایی است که همگام با تغییرات فن آوری های نوین عمران تخصص خود را بروز کرده و تکنیکهای جدید ساختمان را در اولویت کارهای خود قرار داده است. شرکت کاسپین دارای گرید ۵ رشته ساختمان می باشد. این شرکت با گردآوری جمعی از متخصصان و کادر فنی توانا و مجرب پتانسیل بالایی برای اجرای پروژه های ساختمانی در خود به وجود آورده است. کاسپین ارائه دهنده خدمات پیمانکاری در زمینه ابنیه پل، مخازن بتنی، سدها می باشد. همچنین ارائه خدمات پیمانکاری راه، سازه های دریایی و پیمانکاری تخصصی سازه های پیش تنیده در آینده را مدنظر دارد. از مهمترین خدماتی که این شرکت در راستای اهداف خود ارائه می نماید مطابق زیر می باشند:
- مشاوره تخصص
- طراحی معماری ( ساختمانهی بلند مرتبه، مسکونی، اداری ، تجاری ، درمانی و ..)
- طراحی ، تأمین مصالح و اجرای سیستمهای پیش تنیده
- نظارت ، کنترل و بازرسی سیستمهای پیش تنیده
- تهیه مدارک فنی و نقشه های کارگاهی و چون ساخت
- استفاده از تکنولوژی های نوین ساختمان
- تأمین مصالح مصرفی و مدیریت پیمان
- مدیریت پروژه و ساخت
- اجرای اسکلت ساختمان ( بتنی)
- ایمن سازی جداره های گود با بهره گرفتن از روش نیلینگ
مشتریان این شرکت، شرکتهای دولتی، شرکتهای خصوصی، کارفرمایان شخصی و تعاونی ها که در زمینه ساخت فعالیت می کنند می باشد .
بازار انحصاری سازه های پیش تنیده در داخل کشور و بازار های رقابتی خارجی و داخلی در ارائه دیگر خدمات ساختمانی مورد توجه این شرکت می باشد.
این شرکت بر آن است تا با جلب رضایت مشتریان از طریق شناخت و درک صحیح از نیازها و برآوردن آنها با مناسبترین کیفیت و کمترین هزینه ضمن کسب افزایش رضایت مشتری و ارزش نهادن به پرسنل که فلسفه وجودی شرکت را نیز شامل می شود در جهت سرمایه گذاری و ارائه خدمات فنی و مهندسی و زیر بنایی مطابق با استانداردهای پذیرفته شده جهانی، در اقصی نقاط کشور و عندالزوم در کشور های همجوار با در نظر گرفتن ارزشهای بومی و منطقه ای و نیز آخرین فن آوری ها و در اختیار داشتن ماشین آلات مدرن و نیروی انسانی متخصص، متعهد و کارآمد و حفظ منافع طرفین اقدام نماید.
استفاده از فناوری جدید سازه های پیش تنیدگی و همچنین بکارگیری تجهیزات پیشرفته ساخت سازه های مختلف با در نظر گرفتن کاهش هزینه کار فرمایان و افزایش سرعت و کیفیت ساخت همواره از اولویتهای این سازمان می باشد.
استفاده از مهندسان مجرب و متخصص در کلیه امور و کارگران فنی و استفاده از آموزشهای دوره ای برای کلیه کارکنان از ویژگیهایی است که این شرکت را از رقبا متمایز میکند.
توجه به انگیزش کارکنان و استفاده از سیستم جبران خدمت و بکارگیری سیستم نظرات و پیشنهادات از موادی است که در حوزه منابع انسانی شرکت مورد توجه بوده است. حفظ محیط زیست و عدم تخریب آن در کلیه مراحل ساخت و همچنین حفظ منافع ذینفعان شرکت از اهمیت بالایی برخوردار می باشند.
۲-۱-۴ بررسی نقاط قوت و ضعف شرکت کاسپین
(جدول ۴-۱ ) ماتریس SWOT شرکت
ارزش | ضریب | امتیاز | قوتها |
۰/۴ | ۴ | ۰/۱ | : S1وجود سیستم های اطلاعات مورد نیاز |
۰/۴ | ۴ | ۰/۱ | : S2امکان تولید مصالح با نیروی متخص داخلی |
۰/۳۲ | ۴ |
۹۳- (ADH)
۹۴- (EDAC)
۳-۲-۱- تهیه میکروارگانیسم های به کار گرفته شده در این مطالعه:
سویه باکتری همو فیلوس آنفولانزای تیپ b با شماره PTCC 1623 برای تهیه PRP استفاده شد و از کلکسیون میکروبی بخش واکسن های میکروبی و تهیه آنتی ژن انستیتو پاستور ایران تهیه شد.
۳-۲-۲-باز کردن سویه باکتری همو فیلوس آنفولانزای تیپ b لیوفیلیزه و کشت آن :
برای بازکردن هر سوش لیوفیلیزه دستور خاصی وجود دارد، در مورد سوش همو فیلوس آنفولانزای تیپ b با شماره PTCC 1623 ابتداcc /05 محیط BHI broth تزریق شد. سپس، در ٣ مرحله در محیط کشت BHI broth کشت داده شد. این کشت ها در زمان های متفاوتی انجام شدند. در مرحله اول ۲ ساعت، مرحله دوم ۱ ساعت و در مرحله سوم محیط کشت BHI broth ٣ ساعت در درون انکوباتور در دمای ٣٧ درجه سانتیگراد انکوبه میکنیم،بعد از ۶ساعت باکتری فعال می شود. با سرنگ مقدرای از سوشهایی که در محیط مایع BHI broth رشد کرده به داخل پلیت های شکلات آگار (۳ عدد) می ریزیم و سپس کشت انبوه می دهیم و در داخل گرماخانه در ۳۷c قرار می دهیم. بعد از رشد در این محیط برای حصول از اطمینان سالم بودن از محیط کشت از این سه پلیت رنگ آمیزی گرم حاصل می شود تا از آلوده شدن آن به میکروارگانیسمهای دیگر اطمینان حاصل شود. در این مرحله ماکلنی تک می گیریم بدین ترتیب که از یکی از سه پلیت قبلی که اطمینان حاصل شده سالم است مقداری باکتری برداشته و در پلیت جدید کشت خطی می دهیم تا کلنی تک بگیریم. سپس بعد از کشت خطی پلیت را در داخل گرماخانه قرار می دهیم. کلنی های هموفیلوس آنفلوآنزا ظرف ۱۲-۸ ساعت رشد می کنند. بدین ترتیب کلنی تک بدست می آوریم.جهت اطمینان از سالم بودن پلیت فوق رنگ آمیزی گرم به عمل می آید. برای اینکه مطمئن شویم سوش کپسول دار است باید تست آکروفلاوین انجام دهیم، به این صورت که مقداری از کلنی برداشته و بر روی لام با سرم فیزیولوژی حل کرده، سپس یک قطره آکروفلاوین به آن اضافه می کنیم اگر سوش smoth باشد نباید آگلوتیناسیون اتفاق بیفتد
شکال۳-۱- باز کردن سویه PTCC هموفیلوس آنفلوانزا
۳-۲-۳-فرآوردن و تخلیص PRP
برای رسیدن به توده سلولی مورد نیاز جهت تولید PRP به میزان مناسب،برای رسیدن به حجم بالایی از محیط کشت از فرمانتور استفاده شد که مراحل کشت در فرمانتو به این ترتیب است : ابتدا تهیه بذر سپس تیمار عصاره مخمر، در ادامه آماده سازی ، نمونه گیری از فرمانتور و مراحل خالص سازی PRP .
۳-۲-۴- تهیه بذر محیط کشت
در ابتدا باید بذر باکتری آماده گردد و سپس فرمانتور برای تخلیص پلی ساکارید آماده گردد. برای همین منظور از کشت تازه باکتری استفاده کردیم.محتویات بذر مورد نظر به ترتیب زیر برای حجم ۱ لیتر بذر،تهیه شد.
گلوکز: ۲۰ گرم ( شرکت مرک)
گاردن پی پپتون: ۱۰ گرم (شرکت فلوکا)
سیستئین: ۰۴/۰ گرم (شرکت مرک)
تریپپتوفان: ۰۵/۰ گرم (شرکت مرک)
فسفات دی هیدروژن سدیم: ۱ گرم (شرکت مرک)
دی فسفات هیدروژن سدیم ۱۲ مولکول آب: ۲۰ گرم (شرکت مرک)
سولفات آمونیوم: ۲گرم (شرکت سیگما)
سولفات منیزیم ۷ مولکول آب: ۲/۰ گرم (شرکت مرک)
کلرید کلسیم ۲ مولکول آب: ۰۵/۰ گرم (شرکت سیگما)
عصارهی مخمر دیالیز شده: ۲۰ سی سی
نیکوتین آمیددی نوکلئوتید (NAD): 2 میلی گرم (شرکت مرک)
پروتوپورفیرین (Hemine): 1 میلی گرم (شرکت سیگما)
همچنین NAD و Hemine باید بعد از اتوکلاو شدن محیط بذر به صورت فیلتر شده اضافه شوند، چون توسط اتوکلاو شدن از بین می روند.تمام مواد بالا را در یک لیتر آب مقطر حل کرده و سپس اتوکلاو انجام میشود. باید به این نکته نوجه کنیم که چون عصاره مخمر دارای مقادیر حائز اهمیتی پلی ساکارید می باشد که موجب اختلال در فرایند تخلیص پلی ساکارید می کند،این پلی ساکارید باید تا حد امکان حذف گردد وبا اصلاح عصاره مخمر تیمار شود.باکتری کشت داده شده با ۲۰ میلی لیتر محیط بذر شستشو وسپس به محیط کشت بذرمنتقل میشود. سپس بذر در انکوباتور شیکردار با ۷۰ دور در دقیقه و دمای ۳۷ درجه به مدت ۲۴ ساعت قرار میدهیم. تا باکتری رشدکند و محیط کدر شود. زمانی که جذب نوری این محیط در طول موج ۶۰۰ نانومتر به حدود ۴/۰-۵/۰ برسد نشان می دهد که باکتری به فاز رشد لگاریتمی رسیده این مرحله از رشد برای تلقیح محیط بذر به محیط کشت اصلی( فرمانتور ) مناسب است.
۳-۲-۵-تیمار عصاره مخمر:
۱۰۰ گرم پودر عصاره مخمر را در ۲۰۰سی سی آب مقطر حل کرده،برای یکنواخت شدن آن به همراه مگنت روی استیرر بدون حرارت قرار می گیرد.سپس عصاره مخمر را به کیسه های دیالیز با cutoff ، ۱۰هزار که از قبل جوشانده بودیم(برای فعال شدن کیسه ی دیالیز) ریخته و بر علیه ۵ لیتر آب مقطر با دمای ۴درجه بود قرار گرفته ،داخل آلونژ یک عدد مگنت انداخته و آلونژ را بر روی استیرر و در یخچال قرار دادیم. آب جدید باید هم دمای آب قبلی باشد تا به پروتئن های عصاره مخمر آسیب نرسد و هر سه ساعت یک بار آب مقطر آلونژ را تعویض کردیم.تعویض را تا جایی انجام میدهیم که دیگر رنگ آب مقطر آلونژ تغییری نکند.برای مطمئن شدن از تکمیل مرحله دیالیز می توان از تست فتل اسید سولفوریک استفاده کرد.که اگر رنگ آب مقطر آلونژ با این قسمت قهوه ای شد یعنی حاوی پلی ساکارید است،و یا اینکه مایع آلونژ را در دستگاه اسپکتوفتومتری قرار داده و در طول موج ۵۷۰ نانومتر،میزان جذب را قرائت کرده اگر جذبی مشاهده شد یعنی پلی ساکارید در داخل آب مقطر آلونژ وجود دارد.
شکال۳-۲- تیمار عصاره مخمر . چپ: تغییر رنگ آب در روز اول دیالیز عصاره مخمر.راست: روز سوم دیالیز عصاره مخمر بدون تغییر رنگ آب
۳-۲-۶-آماده کردن فرمانتور و تلقیح بذر :
جهت کشت باکتری از فرمانتور نوع کویل با مخزن شیشه ای و حجم ۶۰ لیتر ،ساخت شرکت Novo-Paljas
کشور هلند استفاده کردیم.
شکال۳-۳- فرمانتور Novo-Paljas کشور هلند
ابتدا ۸ لیتر محیط کشت بذر با بهره گرفتن از فشار مثبت و عبور از فیلتر با قطر منافذ ۴۵/۰ مایکرومتر،محیط به مخزن فرمانتور منتقل کردیم و حدود ۴ لیتر آب سرد به آن اضافه کرده،چون برای استفاده از فرمانتور بایدتمام مسیرهای ورودی و خروجی استریل شوند. فرمانتور را روشن، خروجی ها و ورودی های آن را در ۱۲۱ درجه سانتی گراد با بخار حاصل از محیط کشت استریل کردیم. به مدت ۱۵ دقیقه بخار از لوله های ورودی و خروجی آن عبور کرد. بعداز استریل شدن لوله ها، شیلنگ های ورودی و خروجی،سر این ها با کلیپس بسته شد تا آلوده نشوند. پس از این مخزن سرد شد، دما را روی ۳۷ درجه و فشار را روی ۲/۰ بار تنظیم کردیم و به مدت ۲۴ ساعت زمان می دهیم تا مطمئن شویم آلودگی ندارد. بعد از گذشت این زمان و در صورت شفاف بودن محیط، بذر را از انکوباتور شیکردار خارج کرده و حجم ۱ لیتر محیط بذر را به محیط کشت منتقل کردیم، دمای فرمانتور ۳۷ درجه سانتی گراد وPH روی ۴/۷ و ۶/۷ تنظیم شد. همچنین حدود cc 20 NAD و Hemin به فرمانتور منتقل کردیم .زمانی که PH محیط کاهش یابد سود ۵ نرمال به صورت خودکار اضافه می شود تا با کاهش PH محیط باکتری از بین نرود.
شکال۳-۴- راست: اضافه کردن عصاره مخمر و فاکتور رشد – چپ : اضافه کردن بذر به محیط کشت
۳-۲-۷-نمونه گیری از فرمانتور
برای اینکه بدانیم باکتری در چه مرحله ای از رشد است هر ۲ ساعت یک بار از فرمانتور نمونه گیری و OD آن را در ۵۶۰ نانو متر میخوانیم.ابتدا قبل از وارد کردن محیط بذر به محیط فرمانتور یک نمونه گیری انجام داده و به عنوان زمان صفر در نظر میگیریم و OD آن را قرائت میکنیم. اما در مراحل بعدی رشد از محیط کشت به عنوان بلانک استفاده شد.همچنین از محتویات فرمانتور با تهیه لام و رنگ آمیزی گرم از رسوب آن می توان از خالص بودن کشت داخل فرمانتور مطمئن شویم.در زمان های صفر، ۲، ۴، ۶ ساعت از فرمانتور نمونه گرفتیم و OD آن را خواندیم.که تا ۴ ساعت بعد از آن افزایش OD مشاهده شد که نشان دهنده ی رشد لگاریتمی است. اما از ساعت چهارم تا ۶ ساعت بعد از آن افزایش زیادی در OD مشاهده نشد که نشان دهنده ی پایان فاز سکون و شروع فاز مرگ باکتری است. همچنین برای اطمینان حاصل کردن سود را هم قطع کرده چون تغییر زیادی در PH محیط مشاهده نشد.پس فرمانتور را خاموش می کنیم.
بعد از حدود ۶ ساعت رشد باکتری و مرحله لگاریتمی آن کامل شد ، محتویات فرمانتور را تخلیه و به آن حدود ۲۰۰سی سی اتانول ۶% اضافه کرده و یک شب در دمای ۴درجه نگه داشتیم.
۳-۲-۸- مرحله رسوب دهی الکلی
به منظور جداسازی محیط کشت و توده سلولی محتوی فرمانتور را به مدت یک ساعت در ۳۵۰۰ دور سانتریفوژ کردیم.سوپر ناتانت را جمع آوری و سلول های ته نشین شده را دور ریختیم.سانتریفوژ باعث جدا شدن کپسول باکتری از سلول شده و در فاز مایع حل می گردد.
۳-۲-۹- مرحله الکل زنی
سوپرناتانت را جمع آوری شده را به مدت یک شب در یخچال با دمای ۴ درجه نگه داشتیم. به ازاء هر ۵/۲ لیتر سوپرناتانت حدود ۶ لیتر و ۷۵۰سی سی اتانول ۹۶% اضافه شد. بعد از اضافه کردن الکل به سوپرناتانت، سوپرناتانت را به مدت یک شب در دمای ۴درجه نگه میداریم، سپس بعد از یک شب، ظرف های شیشه ای را از یخچال خارج کرده PH آن را اندازه میگیریم(۳/۷)، بعد به آن گلاسیال استیک اسید اضافه و PH آن روی ۸/۶ تنظیم شد. و دوباره به مدت ۲۴ ساعت آن را در دمای ۴ درجه نگه داری می کنیم تا پلی ساکارید ها رسوب کنند.
شکال۳-۵- رسوب حاصل از الکل زنی
۳-۲-۱۰- مرحله شست و شو با کلریدمنیزیم:
بعد از ۲۴ ساعت، محتویات آلونژ هارا به مدت ۱ ساعت با دور ۳۰۰۰ سانتریفوژ کرده، سوپر ناتانت را دور ریخته و رسوب حاصل را نگه داشته و حدود ۸/۱ لیتر کلرید منیزیم ۶ ملکول آب با غلظت ۰۵/۰ مولار به آن اضافه کرده و خوب مخلوط میکنیم تا بطور کامل رسوبات حل شوند و آن را به مدت ۱ساعت با دور ۳۰۰۰ سانتریفوژ میکنیم.رسوبات را دور ریخته و سوپر ناتانت را نگه میداریم.
۳-۲-۱۱- تیمار با ستاولن:
سوپرناتانت جمع آوری شده حدود ۵/۲ لیتر بوده که با حدود ۱۰۰سی سی ستاولن ۲% ( سیگما) مخلوط میکنیم و یک شب در دمای ۴ درجه نگه میداریم.پس از یک شب محلول را به مدت ۱ساعت در ۳۰۰۰ دور سانتریفوژ کرده، رسوب را نگه داشته ، سوپر ناتانت را دور میریزیم.
۳-۲-۱۲- افزودن فسفات سدیم
رسوبات را با حدود یک لیتر فسفات سدیم ۷/۰مولار حل کرده، محلول را به مدت ۱ساعت در ۳۵۰۰ دور سانتریفوژ کردیم ، سوپر ناتانت را از رسوبات جدا کرده، حدود ۹۳۰سی سی سوپر ناتانت حاصل شد.
۳-۲-۱۳- مرحله الکل زنی مجدد:
چون در مرحله اول الکل زنی به ازاء هر لیتر حدود ۲لیتر و ۶۰۰سی سی اتانول ۹۶% اضافه شد این بار هم حدود ۲لیتر و ۴۱۸سی سی اتانول ۹۶% به سوپر ناتانت که حدود ۹۳۰سی سی بود اضافه شد. و این محلول را به مدت یک ساعت در دمای آزمایشگاه نگه داشتیم و سپس در یخچال به مدت یک شب قرار دادیم.
۳-۲-۱۴- تیمار با هیدروکسیل آپاتیت:
سپس محلول را به مدت ۱ساعت در ۳۵۰۰ دور سانتریفوژ کردیم و به رسوب ایجاد شده حدود cc900 محلول هیدروکسیل آپاتیت ۱/۰ درصد (Merck) اضافه شد تا بطور کامل حل شوند، سپس به مدت ۱ساعت با ۳۵۰۰ دور سانتریفوژ انجام می دهیم، به رسوبات حاصل شده از سانتریفوژ حدود ۵۰۰سی سی محلول استات سدیم ۵/۰مولار (Merck) اضافه کرده و به مدت یک شب در یخچال قرار میدهیم. پس از یک شب حدود ۵ گرم سدیم دزوکسی کلات (Merck) اضافه ، حدود ۲ساعت در یخچال آن را نگه داشته، بعد محلول را به فالکن های ۵۰سی سی منتقل و به مدت نیم ساعت ا دور ۹۰۰۰ سانتریفوژ کرده، سوپر ناتانت را جمع آوری، فیلتر و سپس لیوفیلیزه کردیم.
استعارات
سرزمین آزادی ونجات،آغوش خوش بختی نزهتگه ارواح پاک،میعادگاه انسانهای خوب
جهان آخرت
شکنجه گاه درد،مدینه پلید،زندان خاکی
دنیا
شاه راه علی،راه مکه
کهکشان
تیرهای نورانی
شهاب
لطافت زیبای گل درزیر انگشت های تشریح پژمرد
عقل گرایی
درختان بی باک صبور
انسانهای سرسخت ومقاوم
به جرم گستاخی در برابر کویر ازریشه شان بر می کنند وبه تنورشان می افکنند این سرنوشت مقدر آنهاست
استبدادستیزی،شهادت طلبی
بید درخت عزیزی است اما همواره به خود می لرزد
انسان ترسو وسازشکار
شیطان ودیوان هم دستش
دانشمندان غربی
علم عددبین ومصلحت اندیش
علوم تجربی
معلمان ودانایان شهر
بانیان علم
نویسنده با این استعارات زیرکانه خواسته های ایدئولوژیک خود را بیان می دارد ودر پی اقناع خواننده برای پذیرش عقاید مورد نظر خویش است به بیانی دیگر درخلال این متن گفتمان خود ودالهای مربوطه تاحد ممکن برجسته می شوند (شهادت ،رهایی از استبداد،جهان آخرت )ودرعین حال گفتمان غیر ودالهای آن (علم وتکنولوژی ،عقلانیت ،ارزشمندی زندگی این جهانی )به حاشیه رانده می شوند.
ویژگی های دستوری واجد کدام ارزش های تجربی،رابطه ای وبیانی هستند؟
الف.ارزش های تجربی:
درسراسرمتن نویسنده اززبان تمثیل برای بیان عقاید وایدئولوژی خود استفاده می کند به بیانی دیگر از فاعل غیر جاندار(کویر) بهره می برد تا بدین وسیله روی خواننده تاثیر بیشتری بگذارد.وصفاتی رابه کویرنسبت می دهد که مطابق با اصول ارزشیابی تقریبا مورد پذیرش جوامع بشری هستند.بدین گونه نویسنده می خواهد،خواننده را قانع کند که اصول وایدئولوژی او را بپذیرد.کویر واقعیتی است که هیچ شکی دروجودش نیست نویسنده خواسته اینگونه به خواننده بقبولاند ،همانطورکه در واقعیت وجود کویر نمی توان شک کرد در صفات وخصوصیاتی که در متن به آن نسبت داده می شود نباید شک کرد وبدین گونه از تمثیل غیر جاندار برای رسیدن به اهداف گفتمانی خود وتاکید بردالهای گفتمان خود بهره می برد:«درکویربیرون ازدیوارخانه،پشت حصار ده،دیگر هیچ نیست.صحرای بی کرانه عدم است ؛خوابگاه مرگ وجولانگاه هول،راه تنها به سوی آسمان باز است.آسمان کشور سبزآرزوها چشمه ی مواج وزلال نوازشها، امیدها ،و….انتظار!….سرزمین آزادی ،نجات،جایگاه بودن وزیستن،آغوش خوشبختی،نزهتگه ارواح پاک فرشتگان معصوم، میعادگاه انسانها ی خوب ؛ازآن پس که ازاین زندان خاکی وزندگی رنج وبندو شکنجه گاه درد،بادستهای مهربان مرگ ،نجات یابند»