وبلاگ

۴-۳-نتایج حاصل از حساسیت آنتی بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن
نتایج با اندازه گیری قطر هاله عدم رشد و استفاده از دستورالعمل CLSI 2013 به شرح نمودار زیر گزارش شد.
نمودار(۴-۲) نتایج حاصل از روش دیسک دیفیوژن برای تمام ایزوله های انتروکوکی در نمونه های بالینی

۴-۴-نتایج حاصل از استخراج
استخراج ژنوم با روش جوشاندن انجام شد که از نظر کیفی توسط دستگاه الکتروفورز و از لحاظ کمی توسط دستگاه نانودراپ مورد بررسی قرار گرفت.
شکل(۴-۷) بررسی کیفی .الکتروفورز نمونه‌های DNA استخراج شده با روش جوشاندن بر روی ژل آگارز ۱
شکل(۴-۸) بررسی کمی نتایج اندازه گیری غلظت DNA استخراجی با روش جوشاندن با دستگاه نانودراپ در طول موج ۲۶۰ نانومتر
۴-۵-نتایج PCR
پس از انتخاب پرایمرها ، برنامه PCR برای هر جفت پرایمر بهینه سازی شد. بدین معنا که تعداد سیکل ها و دمای اتصال مناسب برای هر جفت پرایمر تعیین شد. پس از بهینه سازی برنامه PCR برای هر جفت پرایمر، برای ۱۵۰ نمونه واکنش‌های PCR انجام گرفت. سپس صحت انجام PCR با انجام الکتروفورز محصولات PCR بر روی ژل آگارز ۵/۱% و رنگ Safe stain جهت مشاهده باند محصول PCR زیر نور UV، به کمک شاخص وزن مولکولی مناسب تأیید شد. همچنان که در تصاویر مشاهده می شود، به وضوح تک باند محصول PCR برای هر نمونه در مقایسه با مارکر وزن مولکولی قابل تشخیص است و هیچ گونه باند اضافی مشاهده نمی شود که نشان از اتصال اختصاصی پرایمر به توالی هدف در ژن و در نتیجه تکثیر قطعه ژن مورد نظر است.
شکل(۴-۹) الف) سمت راست نتایج حاصل از الکتروفورز از ژن aph(3′)-IIIaب) سمت چپ نتایج حاصل از الکتروفورز از ژن
aac(6′)-Ie-aph(2″)-Ia
چاهک اول) مارکر (DNA 100bp).
چاهک دوم) محصول تکثیریافته ژن aac(6′)-Ie-aph(2″)-Ia ( 369 bp ) در سویه انتروکوک استاندارد.
چاهک سوم) محصول تکثیریافته فاقد ژن از نمونه بالینی.
چاهک چهارم-هشتم) محصول تکثیریافته از نمونه های بالینی مورد بررسی.
چاهک نهم) مارکر (DNA 100bp).
چاهک دهم) محصول تکثیریافته ژن aph(3′)-IIIa( 523 bp) در سویه انتروکوک استاندارد.
چاهک یازدهم) محصول تکثیریافته فاقد ژن از نمونه بالینی.
چاهک دوازدهم- هجدهم) محصول تکثیریافته از نمونه های بالینی مورد بررسی.
شکل(۴-۱۰) نتایج حاصل از الکتروفورز از ژن ant(4)-l a
چاهک اول) مارکر (DNA 100bp).
چاهک دوم) محصول تکثیریافته ژن ant(4)-l a ( 296 bp ) در سویه انتروکوک استاندارد.
چاهک سوم) محصول تکثیریافته از نمونه های بالینی مورد بررسی.
فراوانی گونه های انتروکوکوس فکالیس و انتروکوکوس فاسیوم که حاوی فقط یک ژن مقاومت به آمینوگلیکوزیدها بودند به شرح زیر است:
جدول(۴-۲) درصدفراوانی سویه های انتروکوک حاوی یک ژن در نمونه های بالینی